THUNDERTR-FRET时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）是一种便捷灵活的均相检测技术，如今已成为生命科学基础研究和药物研发中最受欢迎的检测方法之一。对于Z6·尊龙凯时细胞因子检测，主要受到关注的因素包括多样性、快速、优质和经济性。

1）多样性：该技术覆盖了人类和小鼠的常见细胞因子，包括ILs、IFNs、TNFs、CCLs和CXCLs等。
2）快速：采用均相免洗无包被的方式，孵育时间仅需1~2小时。
3）优质：
    ① 宽广的动态范围，达到4~5 log，减少了样本稀释的需求，检测上限可达30000 pg/ml。
    ② 信号稳定：即使反复读取、信号衰减或延迟读取（过夜或更久），信号依然稳定可靠。
    ③ CV小：板内CV和批间CV均保持在5%~10%的范围内。
    ④ 完全的数据验证：每个因子的检测均经过灵敏度、特异性、准确性和线性范围等方面的验证。
4）经济性：更灵活，样本需求量仅需15μl，成本较低，价格比ELISA更具竞争力。此外，包装灵活，从100到10000个点均可供给，真正做到按需购买。

THUNDER细胞因子检测技术原理

THUNDER采用双抗夹心TR-FRET技术进行模型检测，一对特性抗体会识别并结合细胞因子，通过光（320~340nm）的激发，荧光供体产生FRET（615nm）信号，进而激发荧光受体发射信号（665nm）。信号强度与细胞因子浓度成正比。

检测数据展示

本检测所采用的荧光供体为镧系元素EuChelate，相较于HTRF TR-FRET的Cryptate，其构象更为简洁，同时保持了优良的稳定性和耐受性。

完全验证的核心要素

一、灵敏度（SENSITIVITY）

灵敏度验证时需考虑样本中细胞因子的浓度范围、检测方法的最低检测限（LOD）和定量下限（LLOQ）。实验中试剂、缓冲液和操作步骤的微小变化可能影响细胞因子的检测，因此严格控制实验条件至关重要。

二、精密度（PRECISION）

1、内测定重复性（Intra-assay Precision）指在相同实验条件下对同一样本的多次测量结果的一致性。该指标反映实验操作的稳定性和可靠性，是评估检测方法性能的重要依据。THUNDER检测显示，三个已知浓度样品在同一板上进行20次测试，得到的%CV（<10%）表明检测的良好重现性。

2、间测定重复性（Inter-Assay Precision）表示在不同实验条件下进行多次测量的结果一致性。THUNDER测试了三个已知浓度样品的间重复性，结果显示CV<10%，再次证明良好的重现性。

三、准确性（ACCURACY）

加标回收率是评估细胞因子检测方法准确性的重要参数，通过在已知浓度样本中加入标准品并检测其回收情况。一般可接受的回收率范围为85%-115%，表明分析方法具有很好的准确性和可靠性。THUNDER的回收率测定表明结果在80-120%范围内，进一步证实了分析的准确性。

四、稀释线性（LINEARITY）

稀释线性评估样品系列稀释后检测结果与稀释倍数的线性关系，确保检测方法的准确性和可靠性。THUNDER评估显示，含10% FBS的培养基中高浓度样品稀释后，均保持80-120%之间的回收率，彰显了良好的稀释线性特性。

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