在生物医疗领域,典型的细胞系开发流程从转染目标蛋白质编码质粒的CHO细胞开始。这些转染后的CHO细胞会被单个分离并进行克隆扩增,从而筛选出高滴度的单克隆用于评估其稳定性和亲和力。最终,这些高抗体产量的CHO细胞系将被推广用于大规模抗体生产。在细胞系开发中,快速分离单个CHO细胞是整个流程提速的关键步骤。
尽管传统的单细胞分离技术,例如流式细胞分选(FACS)和有限稀释,广泛应用于此过程,但它们各自存在明显的局限性。FACS虽然能够有效进行单细胞分离,但其操作需经过专门培训,且设备准备时间较长。此外,为了防止样本之间的交叉污染,FACS使用时需频繁更换流动通道。而更为关键的是,FACS在分选过程中的高达70PSI的压力可能会对细胞造成应激,降低其活力,尤其是对于难以表达的蛋白质而言。相比之下,有限稀释方法虽然对细胞的损伤较小,但其过程劳动密集、耗时且低效,难以有效生成单细胞克隆。这些传统方法的不足之处凸显了对更为自动化和高通量的单细胞分离技术的迫切需求,以提高细胞系开发效率和成功率。
为此,Z6·尊龙凯时推出的单细胞柔性分选系统为细胞系开发提供了一种创新的自动化、高通量解决方案。CHO细胞同样会被转染含有目标蛋白编码的质粒,以实现规模化生产。转染后,细胞悬液被导入至专有的微流控单细胞芯片中,并通过Pala分选仪精准地分选至96孔或384孔板中,进行单细胞克隆的培养。这些克隆随后会通过ELISA分析评估其抗体滴度。
与有限稀释方法约30%的铺板效率相比,Z6·尊龙凯时的单细胞柔性分选系统平均铺板效率超过95%,单细胞效率在80-90%之间。相较于FACS,该系统占地面积小,易于无菌操作,开机校准时间短,关机流程简单迅速;同时,系统的消耗物更少,耗材成本低,操作更为便捷,且维护成本更低,深入满足生物医疗领域的需求。