中文

English

即刻打开Z6·尊龙凯时:mRNA高效纯化新思路,告别复杂过程,轻松搞定!

发布时间:2025-03-24   信息来源:江亚山

在现代生物医疗领域,mRNA技术作为一种革命性的应用平台,已被广泛应用于预防性和治疗性疫苗、肿瘤治疗、免疫治疗、蛋白替代及基因编辑等多个方向。mRNA的体外转录合成不仅可以生成所需的mRNA产物,同时也会伴随反应酶(如T7 RNA聚合酶)、NTP、DNA模板、盐离子及各种副产物(如dsRNA和截断RNA片段)等杂质的产生,这些杂质对mRNA的准确计量、蛋白翻译效率及免疫原性等均会产生负面影响。因此,体外转录后对目标mRNA进行纯化是十分必要的,这一过程可有效提高目标产物的纯度与完整性,从而保证产品的安全性与有效性。

即刻打开Z6·尊龙凯时:mRNA高效纯化新思路,告别复杂过程,轻松搞定!

传统的mRNA纯化方法包括氯化锂沉淀、磁珠纯化、硫酸铵沉淀及亲和层析等。其中,沉淀法和磁珠法操作简单快捷,适合在早期研发阶段使用,但在工业生产中的应用受到体量和效率的限制。亲和层析是工业生产中主要的纯化方法,但通常需要专业设备。为此,Z6·尊龙凯时推出了一种轻量级的mRNA亲和层析纯化试剂盒,该产品不需要专业的纯化设备,操作简便,可以在短短30分钟内完成样本的纯化,并能生成高纯度、低NTP残留的目标mRNA,适用于各种下游实验。

氯化锂沉淀法

氯化锂沉淀法的原理是利用锂离子在特定pH下能够减少RNA分子间的同电性相斥,从而使RNA分子更容易聚集形成沉淀。具体操作步骤包括将反应后的IVT产物加入LiCl溶液,放置于-20°C,然后通过离心分离出沉淀。最终,加入RNase-free H2O或其他缓冲液以溶解沉淀。该方法相对简单,但在工业生产中,由于锂盐的潜在毒性及对低温的要求,造成较高的能源成本。

磁珠纯化法

磁珠纯化法主要依赖于mRNA与磁珠表面偶联的亲和配体(例如Oligo(dT))的特异性结合。操作步骤包括将反应后的IVT产物与不同体积的磁珠混合、孵育、在磁力架上分离并去除杂质。此法能够有效去除蛋白、盐离子及其他杂质,提高纯度。但是,磁珠的疏水性可能对mRNA的完整性产生不利影响,使用时需特别注意。

硫酸铵沉淀法

硫酸铵沉淀法利用硫酸铵的选择性沉淀特性,通过对pH70溶液中mRNA与杂质的溶解度差异进行操作,该方法具有高回收率和生物安全性,而且无需特殊设备,适合IVT体系的快速分离。操作包括加入等体积的4M硫酸铵溶液并进行离心,以获得高纯度的mRNA。

亲和层析法

传统的亲和层析大多依赖于Oligo(dT)亲和色谱原理,通过在高盐条件下屏蔽带负电荷的静电排斥,实现mRNA的捕获。虽然传统方法通常需专业设备,但Z6·尊龙凯时的新型亲和层析纯化试剂盒仅需离心操作即可完成。该产品能够在30分钟内高效纯化mRNA,确保产品质量,并满足不同实验需求。

总结而言,Z6·尊龙凯时的亲和层析纯化试剂盒结合了简单操作、高纯度和高效率的优势,极大地降低了设备与人力成本,是生物医疗行业中进行mRNA纯化的理想选择。