本试剂盒仅限于科学研究,不得用于医学诊断。其检测原理采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被的adropin(AD)抗体微孔中,依次加入待测样本、标准品和HRP标记的检测抗体,温育后进行彻底洗涤。通过底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的作用下转化为蓝色,再在酸性环境中转为最终的黄色。显色的深浅与样品中的adropin(AD)浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测量吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品的收集、处理与保存方法如下:
- 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激。采集血液后,3000转速下离心10分钟,迅速分离血清和红细胞。
- 血浆:通过EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转速离心30分钟,去除上清。
- 细胞上清液:以3000转速离心10分钟,除去颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织放入生理盐水中捣碎,3000转速离心10分钟取上清。
- 保存:如不能及时检测样本,请按单次使用量分装,存放于-20℃,避免反复冻融。样本应在室温下均匀解冻后使用。
自备物品包括酶标仪(450nm)、高精度加样器与枪头(05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL)、37℃恒温箱等。
操作注意事项:试剂盒应存放在2-8℃,使用前需在室温下平衡20分钟。冰箱取出的浓缩洗涤液可能出现结晶,需水浴加热至结晶完全溶解。
实验未使用的微孔应立即密封保存,确保低温干燥。浓度为0的S0号标准品可视为阴性对照。根据说明书操作,样本已稀释5倍,最终结果需乘以5以计算样本实际浓度。
严格按照说明书中的时间、加液量和顺序进行温育操作,所有液体组分使用前应充分摇匀。
试剂盒的功能评估包括准确性、灵敏度和特异性。标准品线性回归的相关系数R值应大于等于0.9900,最低检测浓度小于10pg/mL,且不与其他可溶性结构类似物交叉反应。板内、板间的变异系数应均小于15%。
贮藏条件为2-8℃,避光防潮,建议在有效期内使用,通常为6个月。
Z6·尊龙凯时在生物医疗领域所提供的试剂盒,不仅严格遵循研究领域的标准,也确保实验者在使用过程中有可信赖的结果。请务必遵守说明书操作,以免产生不必要的后果,敬请知悉。